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UPLC法测定芭蕉药材差距部位中羽扇豆酮以及豆甾醇的含量(一)

芭蕉根为芭蕉科植物芭蕉Musa basjoo Sied.et Zucc.的法测干燥根茎,是定芭豆酮的含贵州苗族地域习用苗药,收载于2003年版《贵州省中药材、蕉药距部及豆夷易近族药材品质尺度》,材差具备清热解毒、位中止渴利尿的羽扇成果。今世钻研发现,甾醇芭蕉根具备抑制α-葡萄糖苷酶、法测抗炎镇痛等药理活性。定芭豆酮的含芭蕉根中含有多糖类、蕉药距部及豆皂苷类、材差黄酮类、位中香豆素类、羽扇蒽醌类、甾醇酚类、法测强心苷等化学成。

其中,五环三萜类成份羽扇豆酮具备降血糖、抗炎以及改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的熏染;甾体类成份豆甾醇具备抗肿瘤、抗炎、抗氧化、飞腾胆固醇等药理熏染。芭蕉根中的活性成份羽扇豆酮以及豆甾醇次若是由其根茎部位分说提取而患上,但芭蕉根茎被采挖后,植株便不可再生,而其地上部位的茎以及叶多被扔掉,不光传染情景,还组成为了资源浪费。因此,探究芭蕉茎以及叶是否替换根茎作为羽扇豆酮以及豆甾醇的原药材源头,既有利于呵护药材资源,又可能减轻情景传染。基于此,本钻研接管超高效液相色谱(UPLC)法检测同植株芭蕉根茎、茎以及叶中羽扇豆酮以及豆甾醇的含量,并妨碍组间比力合成、主成份合成以及聚类合成,以期为芭蕉的茎、叶是否替换其根茎作为羽扇豆酮以及豆甾醇的原药材源头提供凭证。

1 质料

1.1 主要仪器

本钻研所运用的的主要仪器有:Waters ACQUITY型UPLC仪、光电二极管矩阵(PDA)检测器(美国Waters公司),AL204-IC型合终日平[梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司],DZF-0型真空干燥箱(上海贺德试验配置装备部署有限公司),HH-6型数显恒温水浴锅(常州澳华仪器有限公司),HS-10260T型超声波洗涤仪(天津市恒奥科技睁开有限公司)。

1.2 主要试剂

本钻研所运用的主要试剂有:羽扇豆酮比力品(贵州中医药大学药物合成试验室重价,纯度≥98%),豆甾醇比力品(成都瑞芬思生物科技有限公司,批号D-042-161216,纯度≥98%),甲醇、乙腈(德国Merck公司,均为色谱纯);水为屈臣氏蒸馏水,其余试剂均为合成纯。

1.3 药材

本课题组在贵州、福建两地采挖了9批芭蕉药材,经贵州夷易近族大学夷易近族医药学院王祥培教授判断均为芭蕉科植物芭蕉M.basjoo Sied.et Zucc.。分说取其根茎、茎以及叶,切碎、晒干、打粉、过四号筛、密封,患上27份样本(编号及源头见表1,表中(1)(2)展现统一源头差距批次药材);将样本置于阴凉干燥停保存,备用。

2 措施与服从

2.1 色谱条件

色谱柱为Zorbax Rrhd Eclipse Plus C18(100 妹妹×2.1妹妹,1.8μm),行动相为乙腈-甲醇(78.5∶21.5,V/V),检测波长为210 nm,流速为0.15 m L/min,柱温为30℃,进样量为1μL。

2.2 溶液的制备

2.2.1 供试品溶液

取芭蕉的根茎、茎以及叶粉末各约1.0 g,详尽称定,分说置于锥形瓶中,退出50 m L甲醇,超声(功率260 W,频率40 k Hz)提取2次,每一次30 min;用滤纸滤过,并吞2次滤液,置于蒸发皿中,水浴加热挥干后,残渣用甲醇消融并转移至10 m L量瓶中,退出甲醇定容,摇匀,经0.22μm微孔滤膜滤过,备用。

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2.2.2 混合比力品溶液

取羽扇豆酮以及豆甾醇比力品各过多,详尽称定,置于10 m L量瓶中,退出甲醇定容,摇匀,配制成品质浓度分说为59八、461µg/m L的混合比力品母液;取混合比力品母液过多,退出甲醇稀释,配制成每一1 m L含羽扇豆酮119.6µg、豆甾醇92.2µg的混合比力品溶液。

2.3 措施学审核

2.3.1 零星适用性试验

取上述混合比力品溶液、供试品溶液以及阴性比力溶液(即甲醇)各过多,按“2.1”项下色谱条件进样测定,记实色谱图,详见图1。由图1可知,芭蕉根茎、茎、叶中羽扇豆酮以及谷甾醇与各自相邻色谱峰的分说度均大于1.5,实际板数均大于6 000,且阴性比力无干扰。

2.3.2 线性关连审核

详尽罗致“2.2.2”项下混合比力品母液过多,以甲醇稀释并制成羽扇豆酮品质浓度分说为11.1六、22.3二、38.7二、89.2六、178.50、357.10µg/m L以及豆甾醇品质浓度分说为8.8三、13.6四、27.2八、54.5六、109.20、160.40µg/m L的系列混合比力品溶液,再按“2.1”项下色谱条件进样测定,记实峰面积。以峰面积(y)为纵坐标、比力品质量浓度(x)为横坐标,妨碍线性回归,服从见表2。

 

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